关于渗漉法提取白芷总香豆素的工艺研究
毕业论文1.6W
摘要:目的优化渗漉法提取白芷香豆素的提取工艺。方法采用单因素和正交实验设计,以白芷总香豆素的含量为评价指标,对白芷香豆素类化合物进行渗漉提取。结果渗漉法提取总香豆素含量高达10.144 mg/g,其最佳工艺条件为:8倍量75%乙醇,浸泡8 h,渗漉速度0.5 ml/min。结论建立的数学模型和优化结果合理,渗漉法提取白芷香豆素可行。
关键词: 渗漉法 白芷香豆素 欧前胡素
白芷为伞形科当归属植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.或杭白芷A.dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Hook.F.var.formosana (Boiss.)Shan et Yuan的干燥根。其性温,气芳香,味辛、微苦,具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的作用,被临床广泛应用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带和疮疡肿痛等症,并有较好的疗效[1]。白芷中总香豆素类为其镇痛的主要成分,又以欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡素为其中主要成分,其止痛效果已被充分肯定[2]。
为了进一步促进白芷香豆素的开发利用,对其有效成分的提取方法的研究是十分必要的。目前常用的白芷香豆素的提取方法以热回流法报道最多。该方法不仅加热时间过长,而且消耗溶剂多。而渗漉法除了具有操作简便、提取率高的优点以外,更重要的是,它可以避免香豆素成分受热损失。本文以白芷总香豆素为评价指标,通过单因素和正交实验设计,考察溶媒浓度、用量、浸泡时间和渗漉速度等因素对提取效果的影响,确定渗漉法提取白芷中香豆素类成分的最佳工艺条件,并将该工艺与超声波提取法、热回流法等进行了比较。
1 器材
1.1 仪器
752型紫外分光度计(上海光谱仪器有限公司);SL500锈钢渗漉缺缺罐(衡阳市金山中药设备制造有限公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-3循环式真空泵(郑州杜甫仪器厂);HH-S数显恒温水浴锅(江苏省金坛市医疗仪器厂);ISO9001电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。
1.2 试剂甲醇、乙醇均为分析纯(成都科龙试剂厂);95%医用酒精;欧前胡素对照品(购自中国药品生物制品检定所)。
1.3 药材
白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm) Hook.f购自成都市荷花池药材市场。
2 方法与结果
2.1 总香豆素含量测定
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称量欧前胡素对照品5.22 mg,置于100 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制得0.052 2 mg/ml对照品溶液。
2.1.2 最佳测定波长的确定
将对照品和样品在200~400 nm处分别进行波长扫描,两者在300 nm处有吸收,而且峰形变化平缓,有利于含量测定,因此以300 nm作为测定波长。
2.1.3 标准曲线的绘制
分别精密吸取对照品溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 ml,用甲醇定容至10 ml,以甲醇为空白,于300nm处测定吸光度。以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标作图,得回归方程:A=47.4C 0.017(r=0.999 7,n=5)。结果表明,欧前胡素对照品溶液浓度在5.22~15.66 μg/ml的.浓度范围内具有良好的线性关系。
2.1.4 供试品溶液的制备与含量测定
精密量取提取液5 ml,水浴挥干溶剂,加入甲醇溶解并定容至50 ml,摇匀,作为供试品溶液,稀释,以甲醇为空白,于300 nm处测定吸光度,并根据标准曲线计算白芷总香豆素含量。
2.2 提取工艺条件选择
2.2.1 提取溶媒考察
为正交设计因素水平设计提供初步依据,对水和醇两种溶媒进行考察。称取20 g白芷初粉(30目),分别用水和乙醇进行提取,提取液浓缩并定容至一定体积,按含量测定方法计算水提液和醇提液中总香豆素的含量。结果见表1。 表1 不同提取溶媒的比较(略)
实验结果表明,以乙醇作为提取溶剂,能提取较高含量的总香豆素,因此采用乙醇渗漉提取白芷总香豆素。
关键词: 渗漉法 白芷香豆素 欧前胡素
白芷为伞形科当归属植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.或杭白芷A.dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Hook.F.var.formosana (Boiss.)Shan et Yuan的干燥根。其性温,气芳香,味辛、微苦,具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的作用,被临床广泛应用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带和疮疡肿痛等症,并有较好的疗效[1]。白芷中总香豆素类为其镇痛的主要成分,又以欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡素为其中主要成分,其止痛效果已被充分肯定[2]。
为了进一步促进白芷香豆素的开发利用,对其有效成分的提取方法的研究是十分必要的。目前常用的白芷香豆素的提取方法以热回流法报道最多。该方法不仅加热时间过长,而且消耗溶剂多。而渗漉法除了具有操作简便、提取率高的优点以外,更重要的是,它可以避免香豆素成分受热损失。本文以白芷总香豆素为评价指标,通过单因素和正交实验设计,考察溶媒浓度、用量、浸泡时间和渗漉速度等因素对提取效果的影响,确定渗漉法提取白芷中香豆素类成分的最佳工艺条件,并将该工艺与超声波提取法、热回流法等进行了比较。
1 器材
1.1 仪器
752型紫外分光度计(上海光谱仪器有限公司);SL500锈钢渗漉缺缺罐(衡阳市金山中药设备制造有限公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-3循环式真空泵(郑州杜甫仪器厂);HH-S数显恒温水浴锅(江苏省金坛市医疗仪器厂);ISO9001电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。
1.2 试剂甲醇、乙醇均为分析纯(成都科龙试剂厂);95%医用酒精;欧前胡素对照品(购自中国药品生物制品检定所)。
1.3 药材
白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm) Hook.f购自成都市荷花池药材市场。
2 方法与结果
2.1 总香豆素含量测定
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称量欧前胡素对照品5.22 mg,置于100 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制得0.052 2 mg/ml对照品溶液。
2.1.2 最佳测定波长的确定
将对照品和样品在200~400 nm处分别进行波长扫描,两者在300 nm处有吸收,而且峰形变化平缓,有利于含量测定,因此以300 nm作为测定波长。
2.1.3 标准曲线的绘制
分别精密吸取对照品溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 ml,用甲醇定容至10 ml,以甲醇为空白,于300nm处测定吸光度。以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标作图,得回归方程:A=47.4C 0.017(r=0.999 7,n=5)。结果表明,欧前胡素对照品溶液浓度在5.22~15.66 μg/ml的.浓度范围内具有良好的线性关系。
2.1.4 供试品溶液的制备与含量测定
精密量取提取液5 ml,水浴挥干溶剂,加入甲醇溶解并定容至50 ml,摇匀,作为供试品溶液,稀释,以甲醇为空白,于300 nm处测定吸光度,并根据标准曲线计算白芷总香豆素含量。
2.2 提取工艺条件选择
2.2.1 提取溶媒考察
为正交设计因素水平设计提供初步依据,对水和醇两种溶媒进行考察。称取20 g白芷初粉(30目),分别用水和乙醇进行提取,提取液浓缩并定容至一定体积,按含量测定方法计算水提液和醇提液中总香豆素的含量。结果见表1。 表1 不同提取溶媒的比较(略)
实验结果表明,以乙醇作为提取溶剂,能提取较高含量的总香豆素,因此采用乙醇渗漉提取白芷总香豆素。
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